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生產(chǎn)細(xì)胞培養(yǎng)常有著相近的營養(yǎng)條件與環(huán)境因素，在傳代的培養(yǎng)過程中很容易發(fā)生細(xì)胞間交叉污染。法規(guī)要求了對細(xì)胞庫的種屬鑒定，主要目的在于：

① 確認(rèn)細(xì)胞來源

② 防止交叉污染

③ 識(shí)別細(xì)胞變異

④ 幫助研究細(xì)胞進(jìn)化和分化

總的來說，細(xì)胞種屬鑒別檢測在生物制品中的目的是確定所使用的細(xì)胞種屬，從而確保產(chǎn)品的質(zhì)量、安全性和合規(guī)性。

基于此，我們利用多重PCR開發(fā)出用于10 種常見細(xì)胞的種屬鑒別(牛/豬/犬/小鼠/大鼠/中國倉鼠/非洲綠猴/恒河猴/貓/人)和種屬間細(xì)胞交叉污染的檢測試劑盒，也提供多種屬近百種細(xì)胞的動(dòng)物細(xì)胞DNA條形碼試劑盒。另外，也可以選擇NGS技術(shù)平臺(tái)能一次性得到最全面的細(xì)胞庫信息。

細(xì)胞種屬鑒別檢測平臺(tái)

?  多重PCR：

細(xì)胞種屬鑒別檢測采用多重PCR檢測技術(shù)，搭配我們自主研發(fā)生產(chǎn)的檢測試劑盒，原理是利用常用物種的細(xì)胞線粒體上3 個(gè)相對保守的基因，設(shè)計(jì)出可同時(shí)檢測10 種常見細(xì)胞的種屬鑒別，靈敏度可達(dá)2 個(gè)細(xì)胞/反應(yīng)，交叉污染檢測限至少達(dá)到1/1000 細(xì)胞污染的水平，擴(kuò)增后搭配瓊脂糖凝膠電泳完成判斷，相較于同工酶法，檢測速度更快、靈敏度更高、試劑采購更容易，也比STR圖譜分析法所鑒別的種屬范圍更廣。

?  DNA條形碼: 

通過對物種特定DNA序列進(jìn)行掃描和比較來鑒定不同細(xì)胞的生物物種的技術(shù)。

具體操作步驟包括：

① 選擇合適的DNA條形碼區(qū)域(COI)

② 前處理采用DNA免提取法

③ 序列分析

④ 數(shù)據(jù)解讀

此方法受到測序分辨率的限制，對細(xì)胞種屬間交叉污染檢測靈敏度較低，因此建議結(jié)合湖州申科多重PCR與NGS平臺(tái)，作進(jìn)一步研究。

?  NGS (二代測序)：

通過NGS技術(shù)，對不同物種細(xì)胞DNA序列的高通量測序，利用比對算法將其與數(shù)據(jù)庫中已知物種DNA序列比對，從而確定待測樣本中可能存在的細(xì)胞種屬。

此外，還可以進(jìn)行基于組裝和聚類的無參考基因組分析，對未知細(xì)胞種屬進(jìn)行鑒定分類。

NGS可以一次性獲取下面訊息：

① 物種鑒定

② 種屬來源

③ 染色體大結(jié)構(gòu)變化

④ 遺傳漂變

⑤ 外源因子污染

⑥ 種間污染

⑦ 種內(nèi)污染

?? 樣品適用性驗(yàn)證服務(wù)

針對樣品進(jìn)行適用性驗(yàn)證，搭配試劑盒全面性能驗(yàn)證報(bào)告，確保檢測結(jié)果準(zhǔn)確性與可信度。

?  精密度（重復(fù)性、中間精密度）驗(yàn)證

?  樣品回收率（準(zhǔn)確性）驗(yàn)證

?? 樣品檢測服務(wù)

利用多重PCR、DNA條形碼和NGS等方法對客戶提供的樣品進(jìn)行細(xì)胞種屬鑒別，出具相應(yīng)的檢測報(bào)告。